抗体人源化ELISA常见样本的处理方法——血液样本

　ELISA（酶联免疫吸附剂测定）是一种快速、灵敏、准确可靠的一种定量分析方法，样本的处理对于ELISA实验的成功有着举足轻重的作用。 利用ELISA进行检测的样本类型包括常见的血液（血清、血浆），组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清以及不常见的皮肤组织、尿液、粪便、肺泡灌洗液、唾液、脑脊液、胸腹水、前列腺液、精液、阴道分泌物等，这些样本收集的时间、处理方法和保存都会影响到ELISA实验的结果。下面就常见ELISA血液样本处理方法的整理，希望对您有所帮助。
　　抗体人源化血液采取后应尽快进行处理，使血清（浆）从与血细胞接触的全血中分离出来。
　　血清与血浆的区别：
　　血清是血液凝固后缺少纤维蛋原的血浆，故血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均等同于血清。
　　选择血清还是血浆样本？
　　由于血清中缺乏很多的凝血因子，但有一些凝血产物，如果是测凝血因子建议选择血浆样本；同时血浆中有纤维蛋白原，如果纤维蛋白原对待检测指标有影响，建议选择血清样本。大多数情况下二者均可以选择。
　　处理方法：
　　血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2 小时或 4 度过夜，然后 1000×g 离心 20分钟，取上清即可。这是一个让血液自然凝固的过程，温度温度越低，凝集越缓慢，可根据需要添加促凝剂。
　　血浆：血浆样本需要抗凝，一般建议用 2.0%EDTA，1%肝素，3.8%枸橼酸钠作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30 分钟内于2 ~8度 1000 g 离心15 分钟，取上清即可检测。根据待检测目标物的性质不同选取不同的抗凝剂。
　　处理样本的过程就是收集目标蛋白的过程，由于蛋白容易变性，降解，故该过程应尽量温和。样本处理之后的储存也非常重要，尤其注意不要反复冻融，样本处理之后可分装密封保存， 4 度保存应小于 1 周，-20 度不应超过 1 个月，-80度不应超过2个月。在标本使用前应缓慢均衡至室温，不应加热使之融解。