文章发表于：2023年03月12日 19:48:56

目前，ELISA方法已被广泛应用于各种抗原和抗体测定。细胞系开发流程在临床检验及科研实验中除正常反应外，有时常可见到一些错误结果。虽然ELISA测定中影响因素较多，其中包括在操作中有一定的技术要求，除此之外，外在因素更是影响甚大。
　　影响ELISA结果正确性的外在因素主要有：
　　标本的采集、贮存等不当所致。如标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存过久、标本凝集不全和采血管中添加物等影响。
　　（1）标本溶血：由于各种人为原因引起的标本溶血，均可因红细胞破坏溶解时释放出 大量具有过氧化物酶活性的血红蛋白，在以辣根过氧化物酶为标记的ELISA测定中，会导  致非特异性显色，干扰测定结果。为克服上述干扰作用，标本采集时必须注意避免溶血。
　　（2）标本受细菌污染：因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶，因此，被细菌污染 的标本同溶血标本一样，亦可产生非特异性显色而干扰测定结果。
　　（3）标本保存不当：在冰箱中保存过久的标本，血清中IgG可聚合成多聚体、AFP可 形成二聚体，在间接法ELISA测定中会导致本底过深、甚至造成假阳性；标本放置时间过  长（如一天以上），有时抗原或抗体免疫活性减弱，亦可出现假阴性。为克服上述干扰，E LISA测定的血清标本宜为新鲜采集；如不能立即测定，5天内测定的血清标本可存放于4℃， 1周后测定的血清标本应低温冻存；冻存后融解的标本，蛋白质局部浓缩，分布不均，应  充分混合后再测定，但混匀时应轻柔，不可强烈振荡。
　　（4）标本凝集不全：在没有促凝剂和抗凝剂存在的情况下，正常血液采集后1/2~2h   开始凝固，18~24h完全凝固。临床检验工作中，有时为了争取时间快速检测，常在血液还 未开始凝固时即强行离心分离血清，此时的血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA测定  过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果；这类情况于次日复查时因血  凝已完全，血清中不再有纤维蛋白原存在，故复查结果变为阴性。为避免上述干扰作用，  解决的办法是血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清，或标本采集时用带分离胶  的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
　　（5）标本管中添加物质的影响：抗凝剂（如肝素，EDTA）、酶抑制剂（如NaN3可抑制 ELISA系统中辣根过氧化物酶活性）及快速分离血清的分离胶等均对ELISA测定有一定干  扰作用。 综上所述，对临床检验ELISA测定中出现的假阳性或假阴性结果，在考虑试剂因 素和操作因素之外，更多的应从标本因素方面进行分析，并应采取相应措施排除干扰作用。