文章发表于：2023年03月21日 20:27:47

　对于ELISA实验，科研人员最怕的就是有误差，我们能做的就是在可控的范围内，大规模细胞培养减少ELISA实验误差，才是实验要点。在ELISA实验操作中，一个个小小的误差导致最终实验存在极大的数据差距，那么如何缩小实验误差？
　　1、科研工作者应该具备从事实验室操作的实验经验和操作经验，对于实验仪器、器械都很熟悉，而且具备总结和分析问题的能力，能够及时处理实验过程中出现的意外。
　　2、使用校对过的微量移液器，排除因为设置错误导致的误差。
　　3、仔细阅读ELISA试剂盒说明书，严格按照说明书来操作，不要混用不同批号的试剂，对于不能确定的，需要反复实验并总结进行改进。
　　4、洗涤彻底，洗涤不干净，会导致假阳性，洗涤液也要新鲜，要现配，陈旧的洗涤液会出现本底增高现象，也可以出现假阳性。
　　5、严格控制反应时间，反应时间比较长，酶失去活性；反应时间短的话，酶结合物不能和血清中的微生物抗原抗体充分结合，生成物机构松散不牢固，容易洗掉，都可以造成假阴性。
　　6、注意试剂盒的保存期，过期的试剂盒不能使用。
　　7、评估试剂的实用性，试剂是否稳定，准确率高低很重要，在试剂启用前，应该对阴、阳对照品反复对照实验，判定试剂符合要求后才能使用。
　　8、严格掌握显色时间，显色时间短的话，加入终止液反应终止后，底物结合物量过少，容易出现假阴性。超过显色要求时间后显色，应判定为假阳性，这可能和试剂有关系，加显色后立即显色，不可报阳性，这可能是本底显色的结果。
　　9、加样需要准确快速，如果加样不准确，酶生成的量不能确定，直接影响显色结果。显色的深浅及A值的测定与加入显色剂和终止液的量有关，所以加样应慎重。要求在一定时间内加样完毕的实验，如果加样迟缓，便出现误差，而且试剂长时间暴露在外，尤其室温过高时，保存期会缩短甚至失效。