文章发表于：2023年03月14日 16:56:05

慢病毒生产ELISA方法优点多，易操作，能够检测数种标本，因而广受科研人员的欢迎。然而，能够影响ELISA实验结果的因素有很多，其中就包括标本的处理。但是不同类型的标本处理方法不同，不同的标本应如何处理呢？接下来就教您如何处理ELISA实验中的六大重点标本：

　　一、尿液、唾液
　　1000×g离心20min，取上清即可检测。但由于ELISA只能检测可溶性蛋白的含量，应保证所有样本均为澄清的液体，沉淀或悬浮物都应离心去除。为了保证检测的准确性，保存于-20℃或-80℃的样本最好在1~6个月内检测。4℃保存的样本应在1周内进行检测。
　　注意：还应保证样本不含NaN3，因为NaN3会抑制HRP的活性，从而导致假阴性的结果。
　　二、细胞裂解液
　　（一）吸去培养板内的培养基，用胰酶消化细胞，加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
　　（二）收集细胞悬液，1000×g离心10min，弃去培养基，用预冷的PBS润洗3次。
　　（三）加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。
　　（四）将样品放入-20℃或-80℃，使样品冷冻，再放室温解冻样品，反复冻融几次，使细胞充分裂解。也可将样品进行超声破碎，以达到裂解的目的。
　　（五）4℃10000×g离心10min，除去细胞碎片，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。